細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

HEK-293+EGFP細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持HEK-293+EGFP細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含HEK-293+EGFP細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于HEK-293+EGFP 細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

MEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                445ml

特級(jí)胎牛血清                                 50 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠固酮(ALD)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human urokinase type plasminogen activator (uPA) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物(uPA)試劑盒

Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 人堿性胎兒蛋白(BFP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Guineapigmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/GPLA試劑盒豚鼠主要組織相容性復(fù)合體(MHC/GPLA)試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母細(xì)胞活性線粒體分離試劑盒10次

Mousebrain-gpeptides,BGP/GehrelinELISAKit小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠組蛋白H3(H3)試劑盒 ，英文名： H3 ELISA Kit

Nude mice of cyclooxygenase 2 (COX-2) ELISA Kit 裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒

Mouseinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 小鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanmacrophageinflammatoryprotein2,MIP-2ELISAKit人巨噬細(xì)胞性蛋白2

土壤氮含量克爾道(Kjeldahl)法定量試劑盒20次

ELISAKitACA-IgA大鼠抗心0脂抗體IgA

兔血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體1   英文名稱：   Rabbit Lctin like oxLDL Receptor 1   規(guī)格：      英文縮寫：   LOX-1

兔脂氧合酶同工酶   英文名稱：   Rabbit Lipoxygenase Isozymes   規(guī)格：      英文縮寫：   LOXI

兔基質(zhì)金屬蛋白酶 1   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 1   規(guī)格：      英文縮寫：   MMP-1

兔基質(zhì)金屬蛋白酶 2   英文名稱：   Rabbit Maix Metalloproteinase 2   規(guī)格：      英文縮寫：   MMP-2

睪丸酸性磷酸酶抗體

絲/蘇蛋白激酶40抗體

EPHA4重組小鼠 EphA4 / HEK8 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽) Protein

Apelin 脂肪癥因子Apelin抗原 0.5mgApelin 脂肪癥因子Apelin抗原

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HSF1 Protein Human 重組人 HSF1 / HSTF1 蛋白

GGT1 Protein Rat 重組大鼠 GGT1 蛋白

HEK-293+EGFP 細(xì)胞專用培養(yǎng)基熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)

CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白

EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein

NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)

FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein