大鼠脊髓成纖維細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
大鼠脊髓成纖維細(xì)胞的相關(guān)*：乳酸球（Lactococcus）噬體特異性PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒 20次
乳酸鏈球（Streptococcus）噬體特異性PCR 20次
擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒
乳酸噬體分離繁殖試劑盒 10次
小量腺病毒氯化銫純化試劑盒 10次
大量腺病毒氯化銫純化試劑盒 5次

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-21

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪問(wèn)量：478

產(chǎn)品咨詢(xún) 15026555973

產(chǎn)品分類(lèi)

技術(shù)文章

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格實(shí)驗(yàn)室玻璃儀器的單調(diào)

進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒閉角型青光眼易感位點(diǎn)的突破

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)的特異性強(qiáng)

小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4elisa試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備步驟

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X1191
規(guī)格	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格	貨號(hào)
大鼠脊髓成纖維細(xì)胞	5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X1191

商品介紹：

名稱(chēng) 大鼠脊髓成纖維細(xì)胞

2.組織來(lái)源：脊髓組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠脊髓成纖維細(xì)胞分離自脊髓組織；脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu)，位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù)；是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來(lái)處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分，在椎管里面，上端連接延髓，兩旁發(fā)出成對(duì)的神經(jīng)，分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形（蝴蝶型）灰質(zhì)區(qū)，主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成；在灰質(zhì)區(qū)周?chē)鸀榘踪|(zhì)區(qū)，主要由有髓神經(jīng)纖維組成；脊髓是許多簡(jiǎn)單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對(duì)的神經(jīng)（稱(chēng)為脊神經(jīng)）分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周?chē)窠?jīng)與腦之間的通路，也是許多簡(jiǎn)單反射活動(dòng)的低級(jí)中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié)，31對(duì)脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的脊髓成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁*，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。脊髓成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)；合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)；組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

5.方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-R167

換液頻率每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

MMP-14 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

Pleiotrophin / PTN 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

Pleiotrophin / PTN 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

MDK / NEGF2 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

E-Cadherin 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

eIF2a 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽

CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽

大鼠 BMPR1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

小鼠 SIRT3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽

小鼠 SIRT3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

大鼠脊髓成纖維細(xì)胞N-叔丁氧羰基-N'-氧蒽基-L-天門(mén)冬酰 98%間二甲苯 99.0%Anti-Phospho-SGK1 (Ser422) /FITC 熒光素標(biāo)記化糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激1抗體IgG

Boc-L-天冬4-環(huán)己酯 99%間二甲苯 CP,95.0% Anti-Phospho-SGK1 (Thr256)/FITC 熒光素標(biāo)記化糖皮質(zhì)調(diào)節(jié)激1抗體IgG

Boc-L-天冬4-甲酯 98%間二甲苯 AR,98%Anti-Shadow/SPRN/FITC 熒光素標(biāo)記新朊蛋白/朊蛋白相關(guān)蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白抗體IgG

Boc-L-賴(lài) 98%間二甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液1mg/ml,溶劑:甲,水質(zhì)分析Anti-Shank1/FITC 熒光素標(biāo)記shank-1抗體IgG

BOC-D-脯 98%鄰二甲苯 Standard for GC,≥99% (GC)Anti-SHBG /FITC 熒光素標(biāo)記性結(jié)合球蛋白抗體IgG

BOC-L-甲酯 99%鄰二甲苯 for HPLC,≥96.0% (GC)Anti-Shh/FITC 熒光素標(biāo)記Shh信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路膜蛋白受體抗體IgG

O-芐基-L- 98%鄰二甲苯 CPShiga-like toxin IIe variant subunit A/FITC 熒光素標(biāo)記抗豬水腫病大腸桿菌志賀樣素Ⅱ型突變體（O139菌株）抗體IgG

BOC-L-羥脯 98%鄰二甲苯 98.0%Anti-SHC/FITC 熒光素標(biāo)記SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgG

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