A-673 (橫紋肌肉瘤細(xì)胞)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介
A-673 (橫紋肌肉瘤細(xì)胞) 的相關(guān)*：奧美坦酯雜質(zhì)混合物規(guī)格：
似梨木雙黃;Ochnaflavone7 規(guī)格：
32619-42-4橄欖苦規(guī)格： 20mg
18323-44-9克林規(guī)格： 100mg
490-67-5冬綠規(guī)格： 10mg
21339-55-9相思規(guī)格： 20mg
美拉嗪規(guī)格： 100mg
539-52-6紫蘇烯規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

產(chǎn)品廠地：上海市

更新時(shí)間：2025-02-17

廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商

訪問(wèn)量：437

產(chǎn)品咨詢 15026555973

產(chǎn)品分類

技術(shù)文章

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品牌	其他品牌	貨號(hào)	GOY-01X0017
規(guī)格	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	產(chǎn)品僅供科研使用	應(yīng)用領(lǐng)域	化工

冷凍保存細(xì)胞之方法？

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下，再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)，以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	貨號(hào)
A-673 (橫紋肌肉瘤細(xì)胞)	1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶	GOY-01X0017

商品介紹：

名稱 A-673 (橫紋肌肉瘤細(xì)胞)

別稱A673; RMS 1598; RMS1598

種屬人類

年齡（性別）女性，15歲

組織來(lái)源肌肉；橫紋肌肉瘤

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)多邊形

背景描述A-673細(xì)胞是一株源自15歲女性的橫紋肌肉瘤的細(xì)胞株。A-673細(xì)胞在軟瓊脂上可形成克隆，亦能在免疫抑制血清處理的小鼠中成瘤。A-673細(xì)胞有四個(gè)以上的標(biāo)志染色體，一個(gè)額外的F染色體和兩個(gè)異常的B染色體。

生物安全等級(jí)1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3次/周

倍增時(shí)間~28小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性Yes, in immunosuppressed mice.

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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A-673 (橫紋肌肉瘤細(xì)胞) 50g 干粉

2 ug pBlueScript SK（+） pBlueScript SK（+）低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100mL DNTris HCl，1M，pH9.0

2 ug pFLD-cat Z+ pFLD-cat Z+ 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)(高pH) Antibiotic Agar 250g

1瓶 CCC-HBE-2細(xì)胞株 CCC-HBE-2 低溫運(yùn)輸和保存

MUG營(yíng)養(yǎng)瓊脂 MUG Nutrient Agar 100g

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